產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
葡萄孢菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Botrytis cinerea | EY00P8742 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品，設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個PCR 管，其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照（用水做模板），6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1個用于PCR陽性對照（用第4號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
1,4-二-2-氟苯 COUMARIN(RG) Eprosartan mesylate
對乙氧基苯甲酰氯 COUMARIN(P) Benzamidine HCl
4-羥甲基四氫吡喃 COUMARIN(P) Chromium(III) chloride
依澤替米貝 COUMARIN(P) Creatine, monohydrate
4-甲基磺酰2-羥基肉桂酸 COUMARIC ACID, 2-(RG) Dextran-10
2,4-二甲基芐反-對香豆酸 COUMARIC ACID, TRANS-P-(RG) Ammomium ferric citrate
反式-3-羥基肉桂酸對羥基肉桂酸 COUMARIC ACID, 4-(4-HYDROXYCINNAMIC ACID)(RG) Choline chloride
伯森坦可替寧 COTININE(RG) D-Gluconolactone
4-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶肉磷酯 CREATINOL-O-PHOSPHATE(P) Forchlorfenuron,4-CPPU,CPPU,KT-30
苯海拉明鹽酸鹽肌酐 CREATININE(P) Magnesium acetate, tetrahydrate
1-巰甲基環(huán)基乙酸肌酐 CREATININE(P) Sodium phosphate, monobasic, monohydrate
偏酸鉛肌酐 CREATININE(P) Calcium gluconate, hydrate
3-甲氧基-4-(二氟甲氧基)苯甲肌酐 CREATININE(RG) N-Dodecyl-b-maltoside
5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-[(叔丁基)二甲基硅基]-N-異丁?；B苷-3'-CREATINE PHOSPHATE DISODIUM SALT TETRAHYDRATE(AS)(REQUEST QUOTE) Aminourea hydrochloride
3-環(huán)甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸 CREATINE PHOSPHATE DISODIUM SALT(RG) Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml
葡萄孢菌探針法PCR熒光定量試劑盒鈣結(jié)合蛋白(CR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品100ml
155kDa核孔蛋白(NUP155)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR6次/盒
腎上腺素能受體α1A(ADRα1A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品6次/盒
多巴受體D1(DRD1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：含量≥670µg/mg3×1ml
CD28分子(CD28)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：>99%6次/盒
不對稱二甲基(ADMA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：>99%100ml
野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR1ml（500X）
集聚蛋白(AGRN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)坦度替尼;MLN518 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品500 ml
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