大鼠原代骨髓來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞
商品屬性:
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3484 |
種屬來源 | 大鼠 | 組織來源 | 骨髓 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態(tài)特征 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)基:大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞wan全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
細(xì)胞基本屬性:
種屬來源:大鼠
組織來源:骨髓骨髓
生長特性:貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:
產(chǎn)品貨期:6周左右
運(yùn)輸方式:T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹::大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來。大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,在生理或病理因素刺激下,可從骨髓動(dòng)員到外周血參與損傷血管的修復(fù)研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路。內(nèi)皮祖細(xì)胞具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法:
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括:
?一、剝離組織,去除外膜、結(jié)締組織等?:將組織從動(dòng)物體中取出,并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時(shí)間短,冷消化時(shí)間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后,過濾、計(jì)數(shù)?:將消化后的細(xì)胞吹打到一個(gè)離心管中,然后過濾、計(jì)數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
白樂杰馬杜拉放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | AD293人胚腎細(xì)胞 |
柯薩奇病毒A16型變種染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | MLTC-1 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
柯薩奇病毒A16型變種探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 | MLTC-1 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
柯薩奇病毒A16型和腸道病毒71型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | MLTC-1小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
柯薩奇病毒A16型和腸道病毒71型定量參考品試劑盒(熒光PCR法) | MM.1R 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
柯薩奇病毒A24型PCR檢測試劑盒 | MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 |
柯薩奇病毒A24型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
柯薩奇病毒A24型變種染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | MM.1S (人IgA- 骨髓瘤細(xì)胞) |
柯薩奇病毒A24型變種探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 | MMAc·SF黑素瘤 |
柯薩奇病毒A2型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | MM28人眼葡萄膜黑色瘤細(xì)胞 |
柯薩奇病毒A4型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | MM.1S 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
柯薩奇病毒A4型和A10型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | MM.1S/LUC (STR)lambda骨髓瘤細(xì)胞 |
柯薩奇病毒A6型、A16型、腸道病毒71型和腸道病毒通用型PCR檢測試劑盒 (熒光PCR法) | 大鼠原代骨髓來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞MM.1S-Luc-GFP熒光素酶/GFP標(biāo)記的人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 |
柯薩奇病毒A6型、A16型和腸道病毒71型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | MM.1S人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 |
柯薩奇病毒A6型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) | MM.1S人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |